质谱仪(MS)
项目介绍
质谱仪以电子轰击等方式使被测物质离子化,形成各种质荷比(m/z)的离子,经加速电场进入质量分析器,使离子按不同的质荷比分离并测量其离子的强度,从而确定被测物质的分子量和结构。学蛋白质组学/代谢组学
样品要求
1. 样品纯度要求较高;需易溶于常见的溶剂(甲醇、乙腈、二氯甲烷)等;
2. 尽量用EP管盛装样品,溶好的液体至少1 mL,浓度不低于10mg/L;粉末样品至少5 mg(纯度高);
3. 需注明样品分子量、分子式等信息;
4. 如需去除基质背景,请提前告知技术人员。
常见问题
低分辨和高分辨的区别,分别能到多少数量级?
主要区别在于测得离子质量数的精确度,低分辨只能到整数位或者小数点后一位,而高分辨分可以到小数点后两位或六位;高分辨质谱能够将分子量相差很小的两种物质进行区分,从而准确推断分子元素。
为什么质谱检测模式有正离子扫描模式和负离子扫描模式?怎么选择?
正、负离子模式是质谱的两种扫描模式,样本在ESI源离子化之后,会同时出现带正电荷和负电荷的离子,根据物质的理化性质的差异,有些产物会带上正电荷有些会带负电荷。
选择哪种模式,要看结构里是否含有孤对电子易得质子的基团,如-NH2、-OH(正离子模式),或易失去质子的基团,如-COOH(负离子模式),有的化合物正负离子都可以测,例如核苷酸。
质谱可以用于测试无机物吗?
质谱一般用于有机分子的鉴定分析,无机物建议用ICP-MS、离子色谱(IC)、化学滴定等手段分析。
质谱的离子源有哪些?怎么选择?
电喷雾源(ESI)、大气压化学电离源(APCI)、大气压光学电离源(APPI)、电子轰击源(EI)、化学电离源(CI)、基质辅助激光解析电离源(MALDI)。常用ESI、APCI、EI;ESI为软电离,基本不产生碎片峰,适用于分析极性强的大分子有机化合物;APCI源会产生准分子离子峰,几乎不产生碎片,主要用来分析中等极性或低极性的小分子化合物;EI为硬电离,会产生丰富的碎片离子(但分子离子峰比较弱很难被捕捉),主要用于挥发性样品。
为什么测试结果中没有出现预期分子量的质荷比峰?
可能是由于离子源选择不合适,也可能是因为样品纯度太低,未检出。